多花指甲兰花粉活力及柱头可授性研究（二）

2.2 不同开花时期花粉的多花活力测定

研究发现，多花指甲兰最佳染色时长为12h。指甲柱实验结果表明，兰花力及TTC染色液和醋酸洋红染色效果最接近离体萌发结果，粉活而I₂-KI染液会使整个视野变红，可授不利于观测；开花4～6d的性研花粉染色效果最好，颜色最深，多花染色率最高（图5），指甲柱花蕾期染色较浅，兰花力及呈粉红色，粉活且染色数目较少，可授开花10d的性研花粉几乎无法染色，染色极浅。多花整个花期花粉活力先上升到达最高值，指甲柱之后下降，兰花力及呈先升后降趋势。

2.3 不同开花时期柱头可授性研究结果

利用联苯胺-过氧化氢法测定多花指甲兰柱头可授性（表2），结果显示3个时期的柱头在检测液中均冒出气泡，其中盛花期过氧化氢酶含量最高，气泡量最大，冒出最迅速，可授性最强。花蕾期次之；衰败期最少最缓慢，可授性最弱；但3个时期的柱头均未变色。

3 讨论

花粉为植物的生殖细胞，它能反映物种演化的一般规律，花粉的性状相对稳定，其微观态结构具有种间特异性，是植物分类的重要依据之一。

兰科植物花粉不同于其他植物，兰科植物花粉由成千上万的花粉粒通过类脂质集合而成。花粉粒由四分体组成的，四分体是构成花粉的基本单位。不同种属兰花花粉形态、表面纹饰不一。如蝴蝶兰花粉块为梨形，中间有大缝隙，花粉块可分为两半；杓兰属花粉表面都有圆形凹陷，外壁结构呈光滑或褶皱状。多花指甲兰花粉近球形，表面具裂隙，无纹饰，类似蜂巢，未见萌发孔。

由于花粉粒结合紧密，相互挤压，花粉粒呈不规则状。随着开花时间的延长，花粉粒粘合得更加紧密，花粉团体积也相应变小。花粉活性与柱头可授性是影响杂交结实率的关键因素，本研究发现，花粉染色在开花4～6d效果最好，花蕾期次之，衰败期几乎无法染色。花粉活性与自身遗传特性有关，罗远华等研究发现不同的文心兰种质花粉活力不同。同时还与环境温度、花期长短等多种因素有关，且兰花花粉团是由花粉粒依靠类脂质聚合而成的，分离困难，一定程度上增加了实验难度。结果表明，最接近真实值的花粉染色方法为TTC染色法和醋酸洋红染色法，I₂-KI的测量值远大于其他3种方法。这是由于I₂-KI是根据花粉粒积累淀粉的量来判断花粉活力，而三核期退化的花粉已有淀粉积累，遇碘呈蓝色反应另外，含有淀粉而被杀死的花粉粒遇I₂-KI也呈蓝色，因此，此法不能准确表示花粉的活力。

开花10d以后TTC染液和醋酸洋红染液几乎无法将花粉染色，而花粉萌发率依然较高，这很可能是因为开花后期花粉粒结合过于紧密，类脂质阻碍了染色液的进入，导致染色困难。兰花花粉属于二核型花粉，有厚实的外壁，寿命很长，易于保存，不会轻易失活。兜兰、蝴蝶兰等花粉活力均表现为先上升后下降的趋势，这与我们的研究结果一致。柱头可授性的结果显示多花指甲兰开花5d可授性最好，但3个时期的柱头在检测液中均未变色，该现象在其他植物中也有出现，如苏芸芸用同种方法研究了藿香的柱头可授性，亦只见气泡，未见柱头变色。多花指甲兰花粉活力最高时期与柱头可授性时期一致，可选择开花4～6d时对多花指甲兰进行人工授粉。

洋兰的野生种大都艳而无香，因而培育有香味的洋兰品种是今后洋兰育种的主要目标之一。黄金小神童是花香引入的典范，为大花蕙兰与四季兰素心的杂交种，气味幽香。多花指甲兰花香清幽、花型美丽，后期可大力开展该种与其近缘种属之间的杂交育种研究。

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