糕点中4种添加剂含量测定及前处理方法优化研究(五）

（2）回收率的糕点考察

分别称取不同类别糕点各3份，按浓度低中高三个水平进行试验，中种精密加线性7(理论浓度为50μg/mL)0.40mL，添加精密量取苯甲酸对照品51.28mg置25mL量瓶中，剂含究加甲醇溶解并稀释至刻度，量测理方摇匀，定及即得浓度为2.0471mg/mL的前处苯甲酸储备液；称取山梨酸对照品51.88mg置25mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，法优摇匀，化研即得浓度为2.0690mg/mL的糕点山梨酸储备液；称取糖精钠对照品55.10mg置25mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，中种摇匀，添加即得浓度为1.9007mg/mL的剂含究糖精钠储备液，糖精钠相对分子质量为205.16，量测理方糖精相对分子质量为182.16，定及两者折算系数为0.8874，故折算为糖精浓度为1.6867mg/mL；称取脱氢乙酸对照品51.71mg置25mL量瓶中，加20g/L氢氧化钠4mL溶解，用水定容至刻度，即得浓度为2.0477mg/mL的脱氢乙酸储备液，对照品储备液5.0mL至100mL容量瓶中，以水定容。准使用液2.00mL，得到添加量(理论值)为10、100、1000mg/kg的低、中、高三个水平上机液，结果见图4，结果表明，在本试验方法下所得到的4组分的不同类别糕点回收率较高，方法准确性好，同时根据GB/T27404要求，被测含量＞100mg/kg，回收率范围为95～105％；被测含量1～100mg/kg，回收率范围为90～110％，从结果数据看，本试验回收率均符合国标要求。

（3）实际样品测定

分别称取糕点、月饼、辣条样品各7个批次，按本试验确定的样品前处理方法和色谱条件，制备供试液并上机测定，结果见表6，样品色谱图见图5(每个类别选择一种一个批次)，从结果可见，分类为糕点的样品所检测出来的山梨酸、脱氢乙酸含量均符合GB27602014中关于山梨酸和脱氢乙酸最大使用量的要求，同时并未检测出苯甲酸以及糖精钠，也达到检测要求。

三、结论

本试验采用高效液相色谱法同时测定糕点中4种防腐剂含量并对样品前处理进行探讨及优化，寻求一种能够同时对不同类别的糕点进行样品前处理的优化方法。本试验在提取溶剂选择、提取时间、蛋白沉淀剂加人量以及净化方式上进行考察，选择最优的前处理条件确定样品前处理方法，并进行方法学考察，通过试验，本方法线性范围在0～50μg/mL范围内良好，回收率达到要求，4组分的分离度满足检测需要，基质检测限也比国标低，满足食品检测要求，本试验的前处理方法能够同时满足糕点(面包)、月饼、辣条三类样品，前处理能够将杂质处理比较干净，对4组分峰型及分离度影响较小，为食品添加剂的检测提供一定的数据参考意义。

目前，由于这4组分的防腐剂和甜味剂所用的检测波长接近紫外波长范围的末端吸收，假阳性样品的检出也比较多，采用PDA检测器中的光谱进行假阳性确认也有一定弊端，因为光谱的纯度角度、阈值的计算，与积分参数、采样速率、分辨率、波长范围、浓度、溶剂类型、噪音基线、阈值计算方式、谱带展宽等多方面因素有关，甚至有标准品溶液也会出现纯度角度＞纯度阈值的情况，这时需要重新建立角度计算方法，故光谱的纯角度阈值可以作为参考，并不能真正意义的对假阳性样品进行确认，本试验下一步的试验方案将开发液相色谱串联质谱方法对假阳性样品进行定性定量确认。

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