食品中邻苯二甲酸酯类塑化剂的检测技术研究进展（二）

2.4 液相色谱-质谱联用法

与GC-MS相似，食品酸酯术研HPLC-MS技术是中邻展将高效液相色谱法与质谱法相结合，拓宽了高效液相色谱法的苯甲检测范围，是类塑一种集高分理性、高选择性和高灵敏度于一体的化剂检测方法。HPLC-MS可用于测定GC-MS难以区分的测技物质，如DINP和邻苯二甲酸二异癸酯(di-iso-decyl phthalate，究进DIDP)具有多种同分异构体，食品酸酯术研在GC和GC-MS的中邻展色谱图中为五指峰，不容易准确定量。苯甲徐敦明等采用HPLC-MS进行测定时，类塑DINP只有一个峰，化剂易于实现定量检测。测技

此外，究进HPLC-MS亦适用于多种PAEs的食品酸酯术研高通量测定，邵秋荣等利用HPLC-MS法测定了酒中23种PAEs的残留量，检出限为0.1 mg/kg，远低于国家限量标准。23种PAEs的加标回收率为87～102%，证明了采用HPLC-MS技术对食品中PAEs多残留检测的可行性。HPLC-MS方法灵敏度高，定性定量准确，近年来在痕量有机物的检测中应用越来越广泛，但是HPLC-MS方法仍然存在HPLC检测法中操作复杂的缺点，同时其所用设备昂贵，在食品污染物的检测应用中受限。

2.5 傅立叶变换红外光谱法

除了有上述检测方法之外，傅立叶变化红外光谱法也被应用于PAEs的检测。傅立叶变化红外光谱具有分辨率高、检测快速等优点，在有机化学、无机化学、材料科学、医药和环境等领域有较多应用。俞雄飞等[31]利用傅立叶变换红外光谱对PAEs进行了快速鉴定。该方法的不足之处在于灵敏度较低、基体干扰较大，需要对样品进行较高的分离提纯，因此在食品中污染物的检测中应用较少。

3 快速检测法

大型仪器检测法在食品中PAEs的检测中表现出灵敏、快速、准确等优点，但仍存在很多不可避免的问题，包括样品前处理复杂、仪器昂贵、需要专业人员操作、有机溶剂用量大等，无法满足对食品中PAEs实时原位快速检测的迫切需求。因此快速检测技术应运而生，主要有免疫检测法、荧光法、电化学检测法、表面增强拉曼光谱法(surface-enhanced Raman spectroscopy，SERS)等。

3.1 免疫检测法

免疫检测法是利用抗原与抗体的特异性识别能力对目标分子进行快速的定性、定量分析。根据检测模式、载体和标记物的不同，免疫检测技术可分为酶联免疫分析法、聚合酶链式反应(polymerase chain reaction，PCR)免疫分析法、免疫亲和层析分析法等。酶联免疫法是研究最多的PAEs免疫分析法，SUN等制备了生物素化的DBP多克隆抗体，建立了一种高灵敏的DBP生物素-链酶亲和素酶联免疫检测法，该方法对DBP具有很高的检测特异性(<4%)，检测浓度范围为0.45～7.06 mg/L，检测限为5 ng/L，对饮料和饮用水中的检测回收率在89.5%～109.5%之间。

ZHANG等提出了一种新型的竞争性酶联免疫吸附法来检测DBP，该方法基于溶解的Ag+对牛血清白蛋白催化的抑制作用来提高检测灵敏度，降低DBP的检测限，比常规的酶联免疫吸附试验降低了16倍。相对于其他免疫检测技术，PCR分析法具有较低的检出限和较高的灵敏度，SUN等建立一种超灵敏的高通量免疫PCR分析方法，用于对食品中邻苯二甲酸二乙酯(diethyl phthalate，DEP)的快速实时检测。研究者将免疫方法与PCR技术相结合，大大提升了对DEP的检测能力，其检测浓度范围达到4 pg/L～40 ng/L，检出限为1.06 pg/L，该工作为食品中痕量PAEs的测定提供了方法学借鉴。免疫亲和层析技术是发展较为成熟的免疫检测技术，现已有基于免疫亲和层析技术的PAEs检测卡的商业化生产。

免疫检测技术的抗干扰能力较差，易出现假阳性结果，其核心试剂抗体属蛋白类物质，易受温度、PH等的影响而失活。

3.2 荧光法

荧光法的原理是利用羟基自由基进攻PAEs，使其转变成具有荧光性的羟基邻苯二甲酸纳，通过对荧光强度的测定可间接得到PAEs的含量。此外，可引入外源荧光材料，通过信号转换实现PAEs的测定。KIM等以Po Po3为外源荧光材料，构建对多种PAEs(邻苯二甲酸二甲酯(dimethylphthalate，DMP)、DEP、DBP、DIBP、BBP、DEHP等)快速检出的适配子荧光传感器，可在30 s内完成对目标分子的定量测试。在对实际样品的检测中，得到了与GC-MS相关媲美的检测结果。WANG等报道了一种利用氨基核酸适配子修饰碳量子点的DBP荧光检测方法，该方法在对酒中DBP的高选择性和高灵敏检测中得到了成功应用，其检测回收率为93.2%～112.4%。在对痕量PAEs的测定中，常将荧光检测方法与免疫检测法相结合，以提高检测准确性和灵敏度。

CUI等成功合成了含氨基的邻苯二甲酸二异丁酯(diisobutyl phthalate，DIBP)半抗原，并制备了抗邻苯二甲酸-牛血清白蛋白的多克隆抗体。以该多克隆抗体为基础，首次建立了一种快速、灵敏的间接竞争性荧光免疫分析法用以检测食用油样品中的DIBP。其检测浓度范围为10.47～357.06 mg/L，检出限为5.82 mg/L，交叉反应率小于1.5。ZHANG等开发了一种高灵敏的竞争性间接荧光免疫分析法，用以实现对邻苯二甲酸二己酯(dicyclohexyl phthalate，DCHP)的特异性检测。该方法以异硫氰酸荧光素为荧光标记物，结合DCHP兔源多克隆抗体建立了DCHP的荧光免疫分析法，达到了0.1～200 mg/L的检测范围和0.05 mg/L的检测限。

采用荧光检测法对非荧光性物质进行检测时，常常涉及荧光物质的修饰，操作步骤较为繁琐，成本较高。此外，荧光检测结果难以长期保存。

3.3 电化学检测法

电化学检测法是现今发展最快速的食品安全检测技术之一，是一种根据待检溶液中物质的电化学性质及其变化规律对物质组分进行定性和定量检测的仪器分析手段，具有检测快速、成本低廉、操作简单、灵敏度高、选择性好、便于实现对液态样品的实时原位检测等诸多优点。根据电极识别元件的不同，电化学传感器可分为适配体电化学传感器、分子印迹电化学传感器、电化学免疫传感器、纳米材料电化学传感器等。WU等采用指数富集配体进化技术筛选了对DBP特异性结合的适配体，以适配体为DBP捕获元件，进一步构建了DBP的电化学适配体传感器，实现了对DBP的选择性高灵敏检出，为塑化剂适配体的筛选和选择性检测提供了新的方法。

陶强等以DINP为检测目标物，制备了DINP分子印迹聚合物，将之修饰于玻碳电极表面得到了可对DINP选择性高灵敏检出的分子印迹电化学传感器。该传感器可直接用于市售白酒样品中DINP的现场检测，无需样品前处理，其检测浓度范围为50 nmol/L～1μmol/L，检测限为27 nmol/L。适配体、分子印迹聚合物作为识别或富集元件在电化学检测中具有其局限性，如适配体的修饰和分子印迹聚合物的低导电性等。对PAEs具有选择性催化能力的功能纳米材料常代替上述识别材料或与其相集合，用于对食品中PAEs的快速检测。XIAO等构建了一种以二茂铁树枝状聚合物-氧化石墨烯修饰玻碳电极的邻苯二甲酸二(2-甲氧基)酯(dimethoxyethyl phthalate，DMEP)电化学传感器。其中，树枝状高分子结构为氧化石墨烯的负载提供了致密的基底，氧化石墨烯为二茂铁树枝状聚合物氧化还原探针的沉积提供了大的比表面积，并提高了复合材料的导电性。

该传感器依托优异的纳米材料实现了对白酒中DMEP的成功检测，检测范围为0.06～1200μmol/L，最低检出限为0.04 mol/L。LIANG等研制了一种新型的简单、无标记的DBP电化学阻抗免疫传感器，该传感器的检出限较低(7μg/L)，选择性较高，抗环境干扰能力较强，具有对实际样品进行实时原位检测的潜力。然而，如上文免疫检测法所述，酶的稳定性较低，易失活。

电化学检测技术具有原位检测的优点，但仅适用于液态样品，且要求样品具有良好的导电性。开发新的电极材料与电极形式，提高电化学检测的稳定性和抗干扰能力是实现食品中PAEs快速原位检测的有效途径。

3.4 表面增强拉曼光谱法

SERS属于分子振动光谱，可反映分子的特征结构，具有对目标分子选择性识别的作用，被广泛应用于生物医学、环境检测、化学成分分析、生物化学传感、疾病诊断等研究领域。SERS检测条件温和、操作简单且无需样品前处理，具有原位快速检测的潜力，受到国内外研究者的广泛关注。金属元素金、银、铂、铷等对SERS具有显著的增强效果，常被用于对食品中PAEs的SERS检测。周亚茹等利用液-液自组装技术制备了金纳米三棱柱，其在乙醇与正己烷之间紧密排列形成膜状结构，再以硅片为其载体可制备便携式SERS基底，该基底对BBP和DEHP均达到了较低的检出限，分别为0.1 mg/kg和0.05 mg/kg。

利用该SERS基底成功实现了对酒中BBP的检出。王欣如等以金纳米三角片为模板制备了金-银核层纳米结构(Au@Ag纳米三棱锥)，并以该材料为SERS活性基底，结晶紫为探针，实现了对酒中BBP和DEHP的高灵敏检测，检测限分别为1 nmol/L和100 nmol/L。胡小燕等采用液-液界面自组装技术，制备了金纳米棒二维SERS基底膜(2D-SERS)，并以结晶紫为探针分子对所构建的2D-SERS进行了测试，结果表明其对BBP的检测具有良好的重现性和较高的灵敏度，检测限可达50 nmol/L，该方法被成功应用于市售白酒中中毒剂量BBP的检测，表现出潜在的实际中应用性。拉曼散射强度容易受光学系统参数等因素的影响，且易出现不同振动峰重叠的现象，影响测试准确性。

4 食品中PAEs检测的难点

尽管食品中PAEs的检测技术已有大量报道，如何实现PAEs的高效监控，保障食品安全仍然面临诸多挑战：

样品前处理工作复杂，无法实现大批量、现场快速检测。

快速检测技术有待加强。不仅要提高快速检测方法的灵敏度，还应该扩大快速检测方法的应用范围。

食品中17种常见的PAEs的限量标准尚未公布，会影响实验者对检测结果的判定，也不利于市场监管。因此合理制定限制PAEs的标准法规也是目前急需解决的问题。

5 结束语

食品中PAEs的有效监控对防止食品污染，保障人们饮食安全具有重要的现实意义。本文对目前常用的食品中PAEs检测技术进行了总结分析。传统大型仪器检测法具有检测灵敏、准确度高的优点，同时也存在设备昂贵、仪器操作复杂等不足之处；快速检测技术具有检测快速、成本低廉、适于原位检测的优点，也具有准确性低、适用范围受限等缺点。食品种类繁多，不同种PAEs物理化学性质亦有差异，根据不同的检测需求灵活选择合适的检测方法，或者采用多种检测技术相结合的方式是实现食品中PAEs高效检测的有效手段。同时，发展更为完善的PAEs检测新模式并加以推广应用将成为未来食品中PAEs检测的主要发展方向。

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