紫外分光光度法测定水果中维生素C含量

维生素C又称L-抗坏血酸，紫外是分光法测人体正常生理代谢所必不可少的一种维生素，能调节人体氧化还原代谢反应，光度果中增强人体对外界环境的定水抗应激能力以及免疫能力，水果中VC含量丰富，维生是含量人体VC重要摄取来源之一。目前，紫外测定VC的分光法测方法有高效液相色谱法、荧光法、光度果中2,定水6-二氯靛酚滴定法、电化学分析法，维生本文采用紫外-可见分光光度法对VC的含量稳定性、最佳提取条件和10种常见水果的紫外VC含量进行了考察与测定，为人们鉴定水果营养价值及储存方式提供一定的分光法测参考。

1材料与方法

1.1材料

猕猴桃、光度果中冰糖橙、橙子、桔子、草莓、油桃、火龙果、菠萝、梨、苹果均购自某农贸市场；抗坏血酸标准品(AR)；冰乙酸(AR)；磷酸(AR)；盐酸(AR)；草酸(AR)。

1.2仪器

UV759CRT紫外-可见分光光度计(上海佑科仪器有限公司)；JY电子天平(上海方瑞仪器有限公司)；GZX-9246数显鼓风干燥箱(上海博迅实业有限公司)。

1.3提取工艺流程

水果样品→去蒂、清洗→研磨成匀浆→称取试样→加入提取剂→避光环境下浸提→4000r/min离心处理→紫外-可见分光光度计测定(243nm)其吸光度→计算质量

1.4实验方法

准确称取5.0000g预处理后的样品匀浆于烧杯中，按料液比(g∶mL)1∶2的比例加入2%醋酸溶液，在室温(20℃)避光环境中浸提30min，将浸提液在4000r/min条件下离心处理10min，取上层清液定容至100mL容量瓶后，用紫外可见分光光度计在最大吸收波长243nm处测定吸光度。每组试样做七次平行试验，取其平均值，根据维生素C标准曲线计算得出样品中维生素C的含量。

1.5紫外吸收曲线的测定

为了考察样品维生素C的含量，采用浓度为0.08mg/mL的标准应用液和样品溶液在紫外-可见分光光度计上进行波长扫描，紫外吸收曲线见图1和图2。

由图1及图2可以看出维生素C标准品的λmax=243nm，水果样品的λmax=244nm，它们的最大吸收波长几乎一致，这说明维生素C在酸性溶液中的最大吸收波长为243nm。

1.6结果计算

将待测液的吸光度值代入维生素C标准曲线，查出待测样品浓度，再根据公式计算出样品中VC的含量。

 2结果与讨论

2.1VC提取正交实验结果分析

通过对料液比、醋酸浓度、提取时间、提取温度等单因素对VC提取效果的分析，进行正交实验。为了确定最佳提取效果，以提取液在λmax=243nm处吸光度为评判指标，对以上四个因素设计L9(34)正交实验，因素水平表见表1，正交实验结果见表2。

由表2可以看出，以上四个因素对VC提取效果的影响的主次顺序依次为A>B=C>D，即：料液比>醋酸浓度=提取时间>提取温度。从正交分析数据可以得出，维生素C的最佳提取条件为A1B1C1D1，即：料液比1∶2(g∶mL)、醋酸浓度2%、提取时间30min以及提取温度20℃。

2.2维生素C标准曲线的绘制

本实验采用紫外-可见分光光度法对VC的含量进行了测定，将1mg/mL的VC标准储备液梯度稀释为0.02,0.04,0.08,0.12,0.16,0.20mg/mL的系列溶液分别检测其吸光度。以质量浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制维生素C标准曲线(见图3)。

由图3可以看出，维生素C在浓度为0.02～0.20mg/mL之间符合朗伯-比尔定律，有良好的线性关系，所得回归方程为Y=3.7994X-0.0066；相关系数R2=0.9996。

2.3样品含量测定

选取新鲜水果桔子、草莓、橙子、红心火龙果等10种样品测定其中VC的含量，根据不同水果样品下测得的吸光度，在维生素C标准曲线中读出提取浓度，计算得出不同水果样品提取质量的柱状关系图，如图4。

由图4可以得出，水果样品中维生素C含量顺序为猕猴桃(407.58mg/100g)>冰糖橙(390.86mg/100g)>橙子(319.31mg/100g)>桔子(284.65mg/100g)>红心火龙果(253.32mg/100g)>草莓(244.76mg/100g)>油桃(201.01mg/100g)>菠萝(181.44mg/100g)>梨(170.95mg/100g)>苹果(144.95mg/100g)。

2.4方法检出限

分别测定试剂空白8组，其吸光度值见表2.3，在置信度约为99%时，其检出限MDL=t(n-1.099)×S=0.003mg/mL。

2.5精密度

实验对10种水果样品分别制备7个平行样，检测其吸光度，计算含量。测得相对标准偏差(RSD)在0.09%～0.58%之间，精密度较好。

2.6加标回收率

采用样品加标的方法进行加标回收率测定，取三份样品加入不同浓度的标液测定其吸光度，平行测定6组，加标回收率在96.6%～106.8%之间。

3结论

本文采用紫外分光光度法对生活中常见的水果中VC的含量进行测定分析，结果表明低浓度的醋酸在冷藏避光的条件下对维生素C具有一定的保护作用。通过单因素实验和正交实验得出：料液比对VC浸提效果影响较大，温度对提取效果影响较小，料液比1∶2(g∶mL)，浓度2%，时间30min，温度为20℃时是最佳提取条件。测定结果表明：猕猴桃中VC含量较高，为407.58mg/100g，苹果中的VC含量相对较低，为144.95mg/100g。该方法检出限为0.003mg/mL,RSD<1%，回收率在96.6%～106.8%之间，本方法检测水果中VC的含量可以得到较好的结果。

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